目的 观察TGF-βⅡR单链抗体/轻链恒定区/鱼精蛋白截短体融合蛋白(简称新型载体)携带miR-29b对体外培养肝星状细胞(HSC)的转染效率和治疗效果,为今后肝纤维化基因治疗提供新载体.方法 脂质体、新型载体和慢病毒携带miR-29b治疗体外培养的HSC,荧光显微镜和流式细胞术观察转染效率,实时荧光定量RT-PCR和Western Blot技术分析collagen α(1) (Ⅰ) mRNA和蛋白表达水平.结果 与对照组比较,慢病毒组的转染效率最高,为70%;其次为新型载体组,为58%;最后为脂质体组,为29%.各载体组collagen α1(Ⅰ) mRNA表现出不同的下降,与对照组比较,慢病毒组下降70%(t=6.316,P<0.01),新型载体组为50%(t=4.082,P<0.01),脂质体组为38%(t =3.014,P<0.05).各载体组collagen α1 (Ⅰ)蛋白也表现出不同的下降,慢病毒组下降为59%(t=4.209,P<0.01);新型载体组为41%(t =4.033,P<0.01;);脂质体组为27%(f=2.842,P<0.05).结论 笔者构建的新型载体具有较高的转染效率,并且携带miR-29b具有较好的抗肝纤维化效果.
作者:俞富军;郑建建;高申孟;董培红
来源:中国医师杂志 2012 年 14卷 10期