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目的 研究谷氨酰胺(Gln)代谢与鼻咽癌放疗抵抗的关系及作用机制.方法 采用慢病毒感染技术建立肾型谷氨酰胺酶(GLS1)敲低的人鼻咽癌细胞系CNE1、6-10B及对照细胞系,脂质体转染技术建立GLS1过表达的人鼻咽癌细胞系CNE2及对照细胞系;采用谷氨酰胺酶抑制剂BPTES抑制GLS1的活性;采用Gln/Glu及Glu检测试剂盒检测细胞Gln代谢情况;体外放射克隆形成实验及流式检测细胞凋亡实验检测Gln代谢改变对放疗敏感性的影响;采用Westem blot检测Gln代谢改变对自噬相关蛋白的表达;质粒转染LC3-EGFP后观察自噬荧光斑点.结果 Gln分解代谢降低后,体外放射克隆形成能力降低,细胞凋亡增加及细胞自噬水平降低;而分解代谢增加后,体外放射克隆形成能力增强,细胞凋亡降低及细胞自噬水平增加.结论 Gln分解代谢增强,激活鼻咽癌细胞自噬,增加鼻咽癌的放疗抵抗性.

作者:邓军容;黄伟;易红;卢珊珊;肖志强;李新辉

来源:中国医师杂志 2018 年 20卷 6期

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作者:
邓军容;黄伟;易红;卢珊珊;肖志强;李新辉
来源:
中国医师杂志 2018 年 20卷 6期
标签:
鼻咽肿瘤 谷氨酰胺 分解代谢 自噬 放射疗法 Nasopharyngeal neoplasms Glutamine Catabolite repression Autophagy Radiotherapy
目的 研究谷氨酰胺(Gln)代谢与鼻咽癌放疗抵抗的关系及作用机制.方法 采用慢病毒感染技术建立肾型谷氨酰胺酶(GLS1)敲低的人鼻咽癌细胞系CNE1、6-10B及对照细胞系,脂质体转染技术建立GLS1过表达的人鼻咽癌细胞系CNE2及对照细胞系;采用谷氨酰胺酶抑制剂BPTES抑制GLS1的活性;采用Gln/Glu及Glu检测试剂盒检测细胞Gln代谢情况;体外放射克隆形成实验及流式检测细胞凋亡实验检测Gln代谢改变对放疗敏感性的影响;采用Westem blot检测Gln代谢改变对自噬相关蛋白的表达;质粒转染LC3-EGFP后观察自噬荧光斑点.结果 Gln分解代谢降低后,体外放射克隆形成能力降低,细胞凋亡增加及细胞自噬水平降低;而分解代谢增加后,体外放射克隆形成能力增强,细胞凋亡降低及细胞自噬水平增加.结论 Gln分解代谢增强,激活鼻咽癌细胞自噬,增加鼻咽癌的放疗抵抗性.