目的:探讨miR-144-3p在膀胱癌顺铂耐药中的作用。方法:体外培养膀胱癌细胞T24，将细胞分为空白组(不予处理)、模拟物对照组、miR-144-3p模拟物转染组、抑制剂对照组、miR-144-3p抑制剂转染组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证转染效果，MTT法检测各组细胞经顺铂处理后的存活率，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测目的蛋白的表达。应用双荧光素报告基因实验验证miR-144-3p与核因子E2相关因子2(Nrf2)的靶向关系，进一步在各组细胞中敲除Nrf2，qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中HO-1、Bcl-2和Caspase-3的mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组相比，miR-144-3p模拟物转染组膀胱癌细胞对顺铂更敏感，而miR-144-3p抑制剂转染组的作用则相反；miR-144-3p模拟物转染组可有效抑制膀胱癌细胞中Nrf2的mRNA和蛋白表达水平(均 P<0.05)，而miR-144-3p抑制剂转染组Nrf2的mRNA和蛋白质水平上调(均 P<0.05)。miR-144-3p模拟物转染组HO-1和Bcl-2的mRNA和蛋白表达显著下调，Caspase-3表达上调(均 P<0.05)，而miR-144-3p抑制剂转染组显示出相反的结果。荧光素酶结果证实miR-144-3p可以直接与Nrf2的3′-UTR区域结合，降低Nrf2的mRNA水平。而当Nrf2被敲除时，不管是miR-144-3p模拟物转染组和miR-144-3p抑制剂

作者：李瑞晓；董维平；张波；郭博昕；苏瑞平；雷永华

来源：中国医师杂志 2023 年 25卷 9期