目的为了检测BALB/C小鼠甲状腺促甲状腺激素受体(TSHR)表达,建立外标准法实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法.方法取正常BALB/C小鼠甲状腺提取甲状腺总RNA,逆转录后进行PCR,PCR产物经回收纯化后作为real-time PCR的标准品,制作标准曲线,优化反应条件使溶解曲线有特异扩增.检测豚鼠TSHR分子免疫的BALB/C小鼠甲状腺TSHR mRNA的表达.结果建立的外标准法SYBR GREENⅠ实时定量RT-PCR方法可以灵敏检测到10 copies的核酸,灵敏度为普通PCR的104倍;溶解曲线只有特异峰;不同标准点批间变异系数范围为5.8
作者：朱云娟；黄丽娟；陈宁；沈炳玲；陆凤先
来源：中国药物与临床 2006 年 6卷 1期
