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目的 观察针对乙型肝炎病毒(HBV)X区设计的siRNA表达载体pGenesil-HBV X对HepG2.2.15细胞相应蛋白表达的影响.方法 筛选出最佳转染效率的剂量配比,将阳离子脂质体METAFECTENE与pGen-esil-HBV X的复合物转染HepG2.2.15细胞,于转染后24、48、72 h采用时间分辨荧光免疫测定技术(TRFIA)检测上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg).结果 具有最佳转染效率而且不显著影响细胞活性的剂量配比为8 μl:2.5μg.pGenesil-HBV X转染HepG2.2.15细胞后24 h,细胞上清液中HBsAg、HBeAg含量尚无显著变化(P>0.05);48 h后HBsAg、HBeAg表达均有明显下降(P<0.01),并且持续至72 h.结论 pGenesilHBV X可以在获得一定转染效率的基础上有效抑制HepG2.2.15细胞中HBV的表达.

作者:刘明社;杨慧;赵中夫;赵龙凤;张国英;张芸;韩德五

来源:中国药物与临床 2006 年 6卷 9期

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作者:
刘明社;杨慧;赵中夫;赵龙凤;张国英;张芸;韩德五
来源:
中国药物与临床 2006 年 6卷 9期
标签:
HepG2.2.15细胞 乙型肝炎病毒 RNA干扰 质粒载体
目的 观察针对乙型肝炎病毒(HBV)X区设计的siRNA表达载体pGenesil-HBV X对HepG2.2.15细胞相应蛋白表达的影响.方法 筛选出最佳转染效率的剂量配比,将阳离子脂质体METAFECTENE与pGen-esil-HBV X的复合物转染HepG2.2.15细胞,于转染后24、48、72 h采用时间分辨荧光免疫测定技术(TRFIA)检测上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg).结果 具有最佳转染效率而且不显著影响细胞活性的剂量配比为8 μl:2.5μg.pGenesil-HBV X转染HepG2.2.15细胞后24 h,细胞上清液中HBsAg、HBeAg含量尚无显著变化(P>0.05);48 h后HBsAg、HBeAg表达均有明显下降(P<0.01),并且持续至72 h.结论 pGenesilHBV X可以在获得一定转染效率的基础上有效抑制HepG2.2.15细胞中HBV的表达.