目的：研究碘化N-正丁基氟哌啶醇（F2）对大鼠心肌细胞无外钙（零钙液）缺氧/复氧（H/R）时环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A（PKA）/细胞外信号调节激酶（ERK）1/2信号通路及细胞损伤的作用。方法建立新生大鼠心肌细胞零钙液H/R模型，于正常培养基、缺氧液和复氧液中加入F2（1×10-6 mol/L）。采用蛋白印迹法检测心肌细胞磷酸化ERK（p-ERK1/2）、总ERK1/2及PKA蛋白表达；酶联免疫吸附法（ELISA）测定心肌细胞cAMP的水平；比色法检测培养细胞上清液乳酸脱氢酶（LDH）的含量；Hoechst 33342染色法检测心肌细胞凋亡情况。结果零钙液H/R可激活心肌细胞ERK1/2，使心肌细胞培养液中LDH浓度升高，心肌细胞凋亡增加；F2和ERK1/2抑制剂U0126及PD98059可下调零钙液H/R所致p-ERK1/2蛋白高表达，抑制细胞LDH漏出，减少细胞凋亡；ERK1/2激动剂表皮生长因子（EGF）可拮抗F2对零钙液H/R心肌细胞p-ERK1/2高表达的抑制作用，进而拮抗F2的心肌保护作用。零钙液H/R对培养心肌细胞cAMP含量及PKA蛋白表达无影响，F2对零钙液H/R状态下心肌细胞cAMP含量及PKA蛋白表达无影响。结论 F2可通过非L-型钙通道依赖机制拮抗心肌细胞H/R损伤，这可能与其抑制非L型钙通道依赖的ERK1/2信号通路激活有关，但与cAMP/PKA信号通路无关。
作者：郑付春；陈高勇；李振鹏；李伟秋；刘幸平；徐涵；石刚刚；张艳美
来源：中国药物与临床 2015 年 2期
