目的 基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性体信号通路观察桂枝芍药知母汤(GD)对尿酸钠诱导的大鼠中性粒细胞炎性信号表达的影响,以期探明其抗炎的药效作用机制.方法 健康雄性SD大鼠30只,按体质量分为5组,每组6只,GD高、中、低剂量组(4,8,16 g/kg)、秋水仙碱阳性对照组(3×10-4 g/kg)均灌胃给药,正常组给予等容积的蒸馏水,每天1次,连续给药7 d.最后1次灌胃1 h后,所有大鼠乙醚麻醉,取血清备用.SD雄性大鼠20只,参照文献方法提取分离大鼠中性粒细胞,接种培养.细胞试验分为2个实验组(不加受体抑制剂,加NALP3受体抑制剂),每个实验组均含6个组,正常对照组加入正常大鼠血清,模型对照组,高、中、低剂量组,秋水仙碱组全部滴加200 mg/L的尿酸钠混悬液造模,同时滴加含药血清,置于CO2细胞培养箱中,孵育12 h取出.酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,DNA-蛋白质互作ELISA(DPI-ELISA)方法检测核因子-κB(NF-κB)活性;蛋白印迹法检测凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-12(caspase-12)信号衔接蛋白表达水平;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)观测NLRP3炎性体mRNA的表达.结果 细胞造模12 h后,与正常组比较,模型组大鼠中性粒细胞IL-1β、IL-6、TN
作者:房树标;王永辉;李艳彦;周然
来源:中国药物与临床 2016 年 16卷 2期