目的观察人甲状旁腺素氨基端1-34片段(hPTH1-34)不同作用方式对人成骨样细胞(SaoS-2细胞)功能的影响,探讨hPTH1-34促进骨合成代谢的分子生物学机制.方法以48 h为一个周期,每个周期分别采用50 ng/ml的hPTH1-34进行连续刺激(刺激48 h/周期)或间歇刺激(分别刺激1、3、6、12、24 h/周期)SaoS-2细胞.采用"金氏"化学法、放射免疫法和竞争蛋白结合法测定碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)和环磷酸腺苷(cAMP)浓度;c-fos基因表达水平采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)进行半定量分析.结果hPTH1-34每周期间歇刺激3、6 h呈时间依赖性显著增加ALP产生(与对照比,P＜0.01;与连续刺激比,P＜0.05或P＜0.01)和cAMP浓度(与对照和连续刺激比,均P＜0.05),并迅速促进c-fos基因表达.未观察到BGP对hPTH1-34刺激的明显反应.结论hPTH1-34对骨合成代谢的促进作用取决于间歇刺激方式,以每48小时间歇刺激3、6 h作用最显著.蛋白激酶A信号途径是hPTH1-34发挥作用的主要途径,c-fos基因可能是重要的细胞内第三信使.
作者：李梅；孟迅吾；周学瀛；邢小平；夏维波；刘怀成
来源：中国医学科学院学报 2004 年 26卷 1期
