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目的 利用Sm抗原模拟表位肽免疫BALB/C小鼠,构建狼疮样鼠模型.方法 用鼠Sm单克隆抗体对噬菌体随机12肽库进行亲和筛选,将筛选的噬菌体阳性克隆行双抗体夹心ELISA检测、DNA序列测定并推导其氨基酸序列,初步确定Sm抗原模拟表位;进而用混合噬菌体阳性克隆皮下免疫BALB/C小鼠,ELISA法检测小鼠血清IgG型抗Sm抗体、抗双链DNA(dsDNA)抗体和抗核抗体(ANA)水平;直接免疫荧光检测小鼠肾脏IgG型免疫复合物的沉积以及HE染色观察小鼠肾脏组织病理损伤情况.结果 免疫筛选获得的5个ELISA强阳性的噬菌体克隆的氨基酸序列IR、SQ、PP出现频率增加;实验组小鼠血清中第28天出现Sm抗体、dsDNA抗体、ANA抗体,且滴度不断升高;第33天出现蛋白尿;肾脏可以检测到IgG型免疫复合物沉积及明显的肾脏病理改变.对照组小鼠无明显自身抗体产生和肾脏病变.结论 利用Sm抗原噬菌体模拟表位肽可成功构建狼疮样小鼠模型.

作者:谢红付;冯浩;曾海燕;李吉;施为;易梅;伍斌

来源:中国医学科学院学报 2007 年 29卷 2期

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作者:
谢红付;冯浩;曾海燕;李吉;施为;易梅;伍斌
来源:
中国医学科学院学报 2007 年 29卷 2期
标签:
系统性红斑狼疮 Sm抗原 噬菌体肽库 模拟表位
目的 利用Sm抗原模拟表位肽免疫BALB/C小鼠,构建狼疮样鼠模型.方法 用鼠Sm单克隆抗体对噬菌体随机12肽库进行亲和筛选,将筛选的噬菌体阳性克隆行双抗体夹心ELISA检测、DNA序列测定并推导其氨基酸序列,初步确定Sm抗原模拟表位;进而用混合噬菌体阳性克隆皮下免疫BALB/C小鼠,ELISA法检测小鼠血清IgG型抗Sm抗体、抗双链DNA(dsDNA)抗体和抗核抗体(ANA)水平;直接免疫荧光检测小鼠肾脏IgG型免疫复合物的沉积以及HE染色观察小鼠肾脏组织病理损伤情况.结果 免疫筛选获得的5个ELISA强阳性的噬菌体克隆的氨基酸序列IR、SQ、PP出现频率增加;实验组小鼠血清中第28天出现Sm抗体、dsDNA抗体、ANA抗体,且滴度不断升高;第33天出现蛋白尿;肾脏可以检测到IgG型免疫复合物沉积及明显的肾脏病理改变.对照组小鼠无明显自身抗体产生和肾脏病变.结论 利用Sm抗原噬菌体模拟表位肽可成功构建狼疮样小鼠模型.