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目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对人黑色素瘤A375细胞自噬的影响.方法 分别采用不同浓度(0μmol·L-1、5μmol·L-1、10μmol·L-1、20μmol·L-1、40μmol·L-1)SFN及联合自噬抑制剂氯喹处理人黑色素瘤A375细胞后,采用MTT法检测细胞增殖情况,Real-time PCR和Western blot检测自噬相关分子LC3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)、Beclin-1和p62以及凋亡相关分子Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达水平.结果 MTT法检测结果显示,SFN呈剂量依赖式抑制A375细胞增殖(F=21.517,P<0.001).与对照组比较,不同浓度(5μmol·L-1、10μmol·L-1、20μmol·L-1和40μmol·L-1)SFN均能上调自噬相关分子LC3Ⅱ、Beclin-1 mRNA和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达,上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达(P<0.05),同时下调自噬相关分子p62及抑凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.05).氯喹联合不同浓度SFN处理A375细胞后各组细胞增殖率均较相应剂量的单纯SFN处理组低(P<0.05).结论 SFN可诱导黑色素瘤A375细胞自噬并促进细胞凋亡,联合自噬抑制剂氯喹能增强细胞增殖抑制作用,可能是黑色素瘤有效的治疗药物.

作者:张心;王博涵;孙健

来源:中国癌症防治杂志 2020 年 12卷 4期

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作者:
张心;王博涵;孙健
来源:
中国癌症防治杂志 2020 年 12卷 4期
标签:
黑色素瘤 莱菔硫烷 自噬 氯喹
目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对人黑色素瘤A375细胞自噬的影响.方法 分别采用不同浓度(0μmol·L-1、5μmol·L-1、10μmol·L-1、20μmol·L-1、40μmol·L-1)SFN及联合自噬抑制剂氯喹处理人黑色素瘤A375细胞后,采用MTT法检测细胞增殖情况,Real-time PCR和Western blot检测自噬相关分子LC3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)、Beclin-1和p62以及凋亡相关分子Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达水平.结果 MTT法检测结果显示,SFN呈剂量依赖式抑制A375细胞增殖(F=21.517,P<0.001).与对照组比较,不同浓度(5μmol·L-1、10μmol·L-1、20μmol·L-1和40μmol·L-1)SFN均能上调自噬相关分子LC3Ⅱ、Beclin-1 mRNA和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达,上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达(P<0.05),同时下调自噬相关分子p62及抑凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.05).氯喹联合不同浓度SFN处理A375细胞后各组细胞增殖率均较相应剂量的单纯SFN处理组低(P<0.05).结论 SFN可诱导黑色素瘤A375细胞自噬并促进细胞凋亡,联合自噬抑制剂氯喹能增强细胞增殖抑制作用,可能是黑色素瘤有效的治疗药物.