目的:探讨沉默Chk1基因在二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用.方法:采用RNAi技术沉默BGC823细胞Chk1基因,q-PCR与Western blot检测Chk1 mRNA与蛋白表达.流式细胞术检测DADS作用与Chk1基因沉默BGC823细胞周期分布情况.Western blot检测Cdc25C与cyclinB1表达.结果:流式细胞术显示,15 mg·L-1DADS作用BGC823细胞12、24、36、48 h后,G2/M期细胞呈时间依赖性增加(P<0.05).Chk1沉默BGC823细胞Chk1 mRNA与蛋白表达下调(P<0.05).沉默Chk1后,G2/M期细胞较对照组降低(P<0.05).DADS处理后,对照组G2/M细胞高于Chk1沉默组(P<0.05).Chk1基因沉默后Cdc25C和CyclinB1表达较对照组增加(P<0.05).DADS处理对照组后,Cdc25C和CyclinB1表达较未处理组降低(P<0.05).DADS处理Chk1沉默组Cdc25C和CyclinB1表达较Chk1沉默下调(P<0.05).结论:Chk1沉默可通过促进Cdc25C和CyclinB1表达减弱DADS阻滞G2/M的作用,DADS阻滞G2/M的检查点是Chk1.
作者:谭亚丽;夏红;曾颖;刘芳;苏波;凌晖;苏琦
来源:中国医药导刊 2018 年 20卷 6期