目的:建立α-烯醇化酶(ENO1)腺病毒过表达载体转染原代培养籽鹅卵泡颗粒细胞模型,探讨ENO1过表达对颗粒细胞孕酮分泌的影响.方法:采用ENO1腺病毒过表达载体以梯度感染复数值(MOI) 100、250、350、400pfu/cell转染原代培养籽鹅卵泡颗粒细胞,于转染后24h、48 h,荧光倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达.双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)研究ENO1过表达对颗粒细胞孕酮分泌的影响.结果:最佳转染条件是,当MOI为350 pfu/cell,转染48h后,转染率达100％;通过荧光定量PCR与Western blot法,检测到ENO1 mRNA与蛋白均过表达(P＜0.01);与培养液组和腺病毒空载体组相比较,ENO1过表达使颗粒细胞孕酮分泌量极显著增加(P＜0.01).结论:ENO1过表达会使体外原代培养的籽鹅卵泡颗粒细胞孕酮分泌量增加.
作者：张伟宏；计红；王江璐；赫荣贺；杨焕民
来源：中国应用生理学杂志 2014 年 30卷 1期
