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目的 建立一种体外诱导干细胞分化的胰岛细胞形成胰岛样结构的技术方法.方法 体外诱导人胚胎胰腺干细胞分化为胰岛细胞,将胰岛细胞制备成浓度分别为1×10~4/ml、3×10~4/ml、1×10~5/ml、3×10~5/ml(1×10~4/ml、3×10~4/ml、1×10~5/ml、3×10~5/ml组)单细胞悬液,在含有细胞外基质(ECM)的培养基中悬浮培养24 h以诱导形成胰岛样结构,在荧光体视显微镜下观察胰岛样结构的形态和大小;采用免疫荧光染色方法检测胰岛样结构中.ECM成分及其细胞组成与定位.将胰岛样结构分别在含5.6和30.0 mmol/L葡萄糖的培养基中体外培养2 h,采用放射免疫法测定上清中胰岛素水平.建立糖尿病人鼠模型,经门静脉将胰岛样结构移植至大鼠肝脏,移植后连续3 d经鼠尾静脉检测血糖水平.结果 90

作者:许世清;门秀丽;张文健;娄晋宁;蔡寒青

来源:中国医药生物技术 2009 年 4卷 6期

知识库介绍

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作者:
许世清;门秀丽;张文健;娄晋宁;蔡寒青
来源:
中国医药生物技术 2009 年 4卷 6期
标签:
糖尿病 胚胎干细胞 细胞分化 胰腺 胰岛移植 Diabetes mellitus Embryonic stem cells Cell differentiation Pancreas Islets of langerhans transplantation
目的 建立一种体外诱导干细胞分化的胰岛细胞形成胰岛样结构的技术方法.方法 体外诱导人胚胎胰腺干细胞分化为胰岛细胞,将胰岛细胞制备成浓度分别为1×10~4/ml、3×10~4/ml、1×10~5/ml、3×10~5/ml(1×10~4/ml、3×10~4/ml、1×10~5/ml、3×10~5/ml组)单细胞悬液,在含有细胞外基质(ECM)的培养基中悬浮培养24 h以诱导形成胰岛样结构,在荧光体视显微镜下观察胰岛样结构的形态和大小;采用免疫荧光染色方法检测胰岛样结构中.ECM成分及其细胞组成与定位.将胰岛样结构分别在含5.6和30.0 mmol/L葡萄糖的培养基中体外培养2 h,采用放射免疫法测定上清中胰岛素水平.建立糖尿病人鼠模型,经门静脉将胰岛样结构移植至大鼠肝脏,移植后连续3 d经鼠尾静脉检测血糖水平.结果 90