目的 探讨高分辨率熔解曲线(high rgsolution meltjng,HRM)技术在线粒体13928G>C突变分析中应用的可行性.方法 在PCR前,体系中加入饱和染料、高温寡核苷酸内参(96℃)、低温寡核苷酸内参(60℃)和与待测样本等体积的已知基因型为GG的模板进行混样扩增,运用HRM技术对定量DNA的PCR产物进行基因分型,并从中随机抽取20例进行测序验证.结果 930例样本中野生型GG占728例,突变型CC占202例;DNA定量有助于HRM分析时对分型结果的判断;同时联合运用高、低温内参比只用一种内参分型效果好;随机抽取的20例样本的测序结果与HRM分型结果相一致.结论 运用高分辨率熔解曲线小扩增子法结合混样法可对线粒体基因组13928G>C突变进行准确分型.
作者:张建佚;冯洁;杨泽;霍正浩
来源:中国医药生物技术 2009 年 4卷 6期