目的 建立高表达 HPPCn 转基因小鼠,为研究该基因在肝癌发生发展中的功能提供研究模型.方法 显微注射外源基因 pGEM-A1b/his-HPPCn 至FVB/N 小鼠原核,注射受精卵移植到假孕受体出生个体.PCR 和 Southern blot 鉴定转基因小鼠基因型,Western blot和 Realtime-PCR 检测转基因阳性和阴性小鼠肝脏 HPPCn蛋白表达情况,HE 染色和透射电镜观察肝脏病理改变.结果 经检测,显微注射共产生 2 只首建鼠,转入的重组HPPCn 基因能在肝脏中特异表达,并能够稳定遗传.转基因小鼠肝脏内 HPPCn 含量明显增高.转基因后并未对小鼠造成不良影响.结论 HPPCn 参与了肝癌发生发展的过程,其在体内的高水平表达,为在体内研究该基因的功能提供了工具.
作者:文川;赛岩;白纪民;刘勇;常菁;王智;崔春萍
来源:中国医药生物技术 2012 年 07卷 2期