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目的:建立一种用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定促肝细胞生长素对SMMC-7721细胞的促生长作用,以测定其生物活性的方法.方法:在体外采用MTT法,观察促肝细胞生长素在不同浓度(6.2~800.0 mg·L-1)及不同的培养时间(24,48,72h),对不同浓度SMMC-7721细胞(1.5~100.0)×103个·mL-1生长的影响作用,并考察了此方法的重复性、与对人胃癌MGC-830及结肠癌HT-29细胞相比较的特异性及与法定3H-TdR掺法比较的相关性.结果:MTT法测定结果表明,浓度为100mg·L-1的促肝细胞生长素在培养时间为48 h时,对细胞浓度为2.5×104个·mL-1的SMMC-7721细胞促生长作用最明显(刺激指数SI值≥6.0),此方法重复性好,并对SMMC-7721细胞具有特异性,与3H-TdR掺法比较测定的SI值差异无显著性.结论:MTT法适用于促肝细胞生长素的活性测定.

作者:邱财荣;李新田;龙超良

来源:中国医院药学杂志 2006 年 26卷 1期

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作者:
邱财荣;李新田;龙超良
来源:
中国医院药学杂志 2006 年 26卷 1期
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四甲基偶氮唑蓝 比色测定法 促肝细胞生长素 SMMC-7721细胞 活性测定
目的:建立一种用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定促肝细胞生长素对SMMC-7721细胞的促生长作用,以测定其生物活性的方法.方法:在体外采用MTT法,观察促肝细胞生长素在不同浓度(6.2~800.0 mg·L-1)及不同的培养时间(24,48,72h),对不同浓度SMMC-7721细胞(1.5~100.0)×103个·mL-1生长的影响作用,并考察了此方法的重复性、与对人胃癌MGC-830及结肠癌HT-29细胞相比较的特异性及与法定3H-TdR掺法比较的相关性.结果:MTT法测定结果表明,浓度为100mg·L-1的促肝细胞生长素在培养时间为48 h时,对细胞浓度为2.5×104个·mL-1的SMMC-7721细胞促生长作用最明显(刺激指数SI值≥6.0),此方法重复性好,并对SMMC-7721细胞具有特异性,与3H-TdR掺法比较测定的SI值差异无显著性.结论:MTT法适用于促肝细胞生长素的活性测定.