目的:研究葛根素对外周血内皮祖细胞(EPCs)缺氧/复氧损伤的保护作用.方法:采用密度梯度离心法和贴壁培养法相结合,使用专用培养基EGM-2,成功分离纯化EPCs,通过形态学、细胞表面分子标志物检测、内皮祖细胞吞噬功能对其鉴定;采用Krebs液建立缺氧/复氧损伤模型,用葛根素干预后,采用MTT法测定细胞活力、2,4-二硝基苯肼显色法测定细胞外乳酸脱氢酶(LDH)释放量、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量;Western blot法考察胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达.结果:与模型组相比,葛根素20.8 mg·L-1及41.6 mg·L-1组显著提高细胞活力(P＜0.05,P＜(0.01);葛根素20.8mg·L-1及41.6 mg·L-1能显著降低NO、MDA含量和LDH释放量(P＜0.01);葛根素20.8 mg·L-1,41.6 mg·L-1,83.2 mg·L-1均显著提高缺氧/复氧后细胞SOD活性(P＜0.01),并上调细胞HO-1、胞核Nrf2蛋白表达(P＜0.01),显著降低胞浆Nrf2蛋白表达(P＜0.01).结论:葛根素可显著拮抗缺氧/复氧对EPCs的损伤,可能与其抑制细胞过氧化损伤,增强细胞抗氧化能力有关.
作者：张聪聪
来源：中国医院药学杂志 2017 年 37卷 13期
