目的 研究基因粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IL-12基因联合作用对H22肝癌细胞凋亡的影响.方法 体外培养肝癌细胞株,分别设置GM-CSF转染组、IL-12转染组、GM-CSF和IL-12共染组、阴性对照组(空载组).构建PIB-CMV3-GM-CSF和PIB-CMV3-IL-12真核表达载体,转染肝癌细胞36 h后,采用荧光显微镜检测转染效果;RT-PCR 检测IL-12、GM-CSF、p53、p38及(C-JUN mRNA表达水平;Western blot 法检测IL-12、GM-CSF、p53、p38及C-JUN蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 经荧光显微镜观察发现,转染GM-CSF组、转染IL-12组及共转染组均有较强的绿色荧光,说明质粒成功转入细胞.另外,空载组、GM-CSF转染组、IL-12转染组、GM-CSF和IL-12基因联合组p53 mRNA的表达量分别为1.2±0.10、4.3±0.98、4.2±0.34、9.2±0.87,蛋白表达量分别为1.0±0.10、3.6±0.34、3.8±0.30、5.0±0.60,与空载组比较,3组质粒转染组p53 mRNA和蛋白表达量均显著上调(P均<0.01);而与转染GM-CSF组、转染IL-12组比较发现,联合组能更加明显上调p53 mRNA和蛋白的表达量(P均<0.01).与此同时,空载组、GM-CSF转染组、IL-12转染组、GM-CSF和IL-12基因联合组p38 mRNA表达量分别为7.5±0.9、3.5±0.45、3.7±0.25、1.0±0.11,p38 蛋白表达量分别为1

作者：柳思琪；张倩；邵雪；贾胜男；马静婷；潘留兰

来源：中国综合临床 2017 年 33卷 7期