[目的]检测miR-139在乳腺癌细胞系及组织中的表达,验证CXCR4是否为miR-139直接调控的靶基因,并探究miR-139是否可通过靶向抑制CXCR4/CXCL12生物轴从而抑制乳腺癌细胞的定向转移.[方法]实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)用于检测miR-139在34对转移性乳腺癌患者的原发灶、转移灶及癌旁组织中,在5株乳腺癌细胞系及1株正常乳腺上皮细胞中的表达.将包含miR-139的重组慢病毒质粒及其阴性对照空载体质粒vector 分别以病毒/细胞数量=20的比例感染MDA-MB-231细胞,经2.0μg/ml嘌呤霉素筛选,成功构建稳定表达miR-139或vector的MDA-MB-231细胞,将MDA-MB-231 vector和MDA-MB-231miR-139细胞分别经尾静脉注射到BALB/c裸鼠中,构建乳腺癌裸鼠转移模型,观察过表达miR-139对裸鼠体内转移能力的影响.TargetScan软件用于预测miR-139的靶基因,根据预测结果,将野生型或突变型CXCR4的3'-UTR区域克隆到荧光素酶报告基因的下游(CXCR4-wt或CXCR4-mut)并分别与miR-139 mimics或scramble共转染后检测荧光素酶的活性.qRT-PCR和Western blot分别检测转染miR-139 mimics和scramble后CXCR4、CXCL12的mRNA和蛋白表达.[结果] miR-139在转移性乳腺癌原发灶和转移灶中的表达均低于癌旁组织,且转移灶中表达最低,miR-139在乳腺癌细胞系中的表

作者：张振华；阚云珍；苏自杰

来源：中国肿瘤 2018 年 27卷 1期