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目的:通过观察沉默瞬时受体阳离子通道亚家族V成员6(transient receptor potential cation channel,subfamily V member 6,TRPV6)对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响和细胞内钙的浓度变化,以及1,25(OH)2D3、CaCl2及CuCl2在SD大鼠结肠肿瘤模型建立中的影响,探索TRPV6在结肠癌发生过程中的相关作用,为结肠癌的防治寻找新的靶点.方法:通过构建慢病毒颗粒感染结肠癌SW480细胞,采用免疫组织化学法、Western bolt、PCR技术检测TRPV6蛋白及mRNA的表达,MTT法、迁移及凋亡实验观察结肠癌SW480细胞增殖、迁移及凋亡变化,高速离子成像系统测定结肠癌SW480细胞内的Ca2+浓度变化.以二甲基肼(dimethyl hydrazine,DMH)建立SD大鼠结肠肿瘤模型,分为实验组(DMH组)和干预组[(DMH+1,25(OH)2D3组、DMH+CuCl2组)]、对照组,干预组分别予1,25(OH)2D3 (37.5 nmol/kg)、CuCl2(375μmol/kg)对模型进行干预.观察各组大鼠结肠腺瘤及腺癌的发生情况,Western blot检测各组结肠组织中TRPV6蛋白的表达情况.结果:TRPV6-RNAi转染结肠癌SW480细胞后,TRPV6 mRNA及蛋白表达减少,细胞Ca2+浓度水平降低,结肠癌SW480细胞的增殖率、迁移能力下降,细胞凋亡率增加,与空白对照组及阴性对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05).对照组大鼠成瘤率为0,DMH+1

作者:谢臣武;刘模荣;董辉;徐靖宇;谢睿;文国荣;刘莲花

来源:中国肿瘤临床 2018 年 45卷 21期

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谢臣武;刘模荣;董辉;徐靖宇;谢睿;文国荣;刘莲花
来源:
中国肿瘤临床 2018 年 45卷 21期
标签:
TRPV6 基因沉默 钙离子通道 结肠癌 二甲基肼 transient receptor potential cation channel subfamily V member 6 (TRPV6) gene silencing calcium ion channels colon can-cer dimethyl hydrazine
目的:通过观察沉默瞬时受体阳离子通道亚家族V成员6(transient receptor potential cation channel,subfamily V member 6,TRPV6)对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响和细胞内钙的浓度变化,以及1,25(OH)2D3、CaCl2及CuCl2在SD大鼠结肠肿瘤模型建立中的影响,探索TRPV6在结肠癌发生过程中的相关作用,为结肠癌的防治寻找新的靶点.方法:通过构建慢病毒颗粒感染结肠癌SW480细胞,采用免疫组织化学法、Western bolt、PCR技术检测TRPV6蛋白及mRNA的表达,MTT法、迁移及凋亡实验观察结肠癌SW480细胞增殖、迁移及凋亡变化,高速离子成像系统测定结肠癌SW480细胞内的Ca2+浓度变化.以二甲基肼(dimethyl hydrazine,DMH)建立SD大鼠结肠肿瘤模型,分为实验组(DMH组)和干预组[(DMH+1,25(OH)2D3组、DMH+CuCl2组)]、对照组,干预组分别予1,25(OH)2D3 (37.5 nmol/kg)、CuCl2(375μmol/kg)对模型进行干预.观察各组大鼠结肠腺瘤及腺癌的发生情况,Western blot检测各组结肠组织中TRPV6蛋白的表达情况.结果:TRPV6-RNAi转染结肠癌SW480细胞后,TRPV6 mRNA及蛋白表达减少,细胞Ca2+浓度水平降低,结肠癌SW480细胞的增殖率、迁移能力下降,细胞凋亡率增加,与空白对照组及阴性对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05).对照组大鼠成瘤率为0,DMH+1