目的:构建表达人环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,cox-2)反义RNA的腺病毒载体,研究其对人食管癌细胞生长的影响.方法:把人cox-2基因的cDNA片段反向克隆于穿梭质粒pHCMVSP1A的CMV启动子之下,获得pAd-AShcox-2,通过脂质体与pJM17共转染293细胞,经同源重组产生编码cox-2反义RNA的重组腺病毒--Ad-AShcox-2.PCR鉴定为阳性克隆并大量扩增,转染食管癌细胞EC9706,用生长细胞计数,3H-TdR掺入及免疫细胞化学的方法,研究对食管癌细胞生长、cox-2表达、DNA合成的影响.结果:成功构建编码cox-2反义RNA的重组腺病毒Ad-AShcox-2,病毒感染EC9706后,cox-2表达降低,3H-TdR掺入量减少,与对照组比较P<0.001;同时发现食管癌细胞的生长受抑制.结论:减少cox-2的表达可能是治疗食管癌的一种新途经.
作者:吴清明;李胜保;刘重贞;王小虎;谢国建;于皆平
来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2001 年 8卷 4期