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目的:研究沉默乳腺癌相关抗原1(breast cancer-associated antigen 1,BRCAA1)基因对胃癌细胞株MGC-803的抑制作用及其可能的机制.方法:构建BRCAA1基因shRNA载体,将构建的shRNA-BRCAA1质粒与阴性对照质粒shRNA-N转染胃癌MGC-803细胞,24 h后用荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR检测BRCAA1和GAPDH基因mRNA表达水平.MTT法检测转染后24、48与72 h的细胞增殖水平,Annxin-V PE/7AAD检测转染24 h后的细胞凋亡水平,Western blotting检测转染48 h后细胞的凋亡相关蛋白表达水平.结果:BRCAA1 siRNA表达质粒转染MGC-803细胞24 h 的转染效率为(81.2±2.6)

作者:刘彬;崔大祥;杜彤;李智铭;宋华;杨浩;鲍晨晨;甘慧

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2008 年 15卷 6期

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作者:
刘彬;崔大祥;杜彤;李智铭;宋华;杨浩;鲍晨晨;甘慧
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2008 年 15卷 6期
标签:
乳腺癌相关抗原基因1 shRNA 胃癌细胞 增殖 细胞凋亡
目的:研究沉默乳腺癌相关抗原1(breast cancer-associated antigen 1,BRCAA1)基因对胃癌细胞株MGC-803的抑制作用及其可能的机制.方法:构建BRCAA1基因shRNA载体,将构建的shRNA-BRCAA1质粒与阴性对照质粒shRNA-N转染胃癌MGC-803细胞,24 h后用荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR检测BRCAA1和GAPDH基因mRNA表达水平.MTT法检测转染后24、48与72 h的细胞增殖水平,Annxin-V PE/7AAD检测转染24 h后的细胞凋亡水平,Western blotting检测转染48 h后细胞的凋亡相关蛋白表达水平.结果:BRCAA1 siRNA表达质粒转染MGC-803细胞24 h 的转染效率为(81.2±2.6)