目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3K P85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响.方法:将包含AKT1、PI3K P85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染至乳腺癌MCF-7细胞.应用real-time PCR和Western blotting检测转染后目的基因mRNA和蛋白的表达水平,并用Western blotting检测目的基因被沉默后PCNA、cyclin D1和P53的表达情况.应用MTT法、流式细胞术、2-D和3-D Matrigel实验检测MCF-7细胞转染前后的细胞增殖周期和侵袭能力.结果:重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K介导的靶向AKT1, PI3K P85 shRNA可以有效抑制目的基因AKT1和PI3 Kp85的mRNA和蛋白表达;下游相关因子PCNA、cyclin D1的表达亦下调,P53表达则上调.MTT法结果显示rAd5-siAKT1-siPI3K组细胞生长抑制率>50
作者：梅玫；任玉；周旋；赵津辉；王凡；高伟；祁艳斌；姚智；蒋伶活
来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2010 年 17卷 1期
