目的:运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默结肠癌细胞株LoVo中Livin基因的表达,研究Livin对LoVo细胞增殖和凋亡等生物学特性的影响.方法:构建针对Livin基因的干扰质粒pSilencer4.1-L1和pSilencer4.1-L2,转染LoVo细胞,通过RT-PCR、Western blotting检测转染后LoVo细胞Livin的表达,并用流式细胞术、克隆形成实验、MTT法检测转染后LoVo细胞的凋亡、细胞周期、克隆形成、增殖以及对顺铂的敏感性.结果:成功构建pSilencer4.1-L1、pSilencer4.1-L2干扰质粒,pSilencer4.1-L1可有效沉默LoVo细胞中Livin mRNA和蛋白的表达(P＜0.01),但pSilencer4.1-L2效果不明显.与对照组相比,pSilencer4.1-L1转染后LoVo细胞的凋亡率增加[(24.2±3.2)％vs(8.1±1.4)％,P＜0.01]；细胞增殖明显抑制,转染后72 h增殖抑制率约70％；细胞的克隆形成率明显下降[(15±4.6)％vs(85±5.8)％,P＜0.01];S期细胞明显增加[(45.7±4.9)％vs(28.0±3.0)％,P＜0.01],G1期细胞明显减少[(43.0±5.2)％vs(62.8±5.1)％,P＜0.01]；对顺铂的敏感性增加,细胞凋亡率增加[(65.3±6.2)％vs(43.4±6.9)％,P＜0.01].结论:pSilencer4.1-L1可有效沉默结肠癌LoVo细胞中Livin基因的表达,抑制细胞增殖和克隆形成、诱导细胞凋亡、增加细胞对顺铂的敏感性.

作者：邹爱民；高文香；朱文芳；沈建军

来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2011 年 18卷 6期