目的:构建表达Bcl-XL小发夹RNA的腺病毒载体(Ad/Bcl-XL shRNA)并探讨其抗肿瘤作用.方法:构建、纯化重组腺病毒Ad/Bcl-XL shRNA.通过Western blotting、MTT分析验证它对Bcl-XL的下调及其杀伤肿瘤细胞的作用,并检测其处理后细胞凋亡信号的活化情况；在裸鼠皮下荷瘤模型中验证其体内抗肿瘤作用.结果:成功构建和纯化了Ad/Bcl-XL shRNA,它能显著下调结肠癌DLD1细胞Bcl-XL蛋白的表达；与Ad/GFP、PBS组相比,Ad/Bcl-XL shRNA组明显抑制人结肠癌细胞DLD1的生长[1000 MOI时(60.6±4.8)％vs(99.0±2.6)％、100％；2 000 MOI时,(37.3±6.9)％vs (99.0±2.1)％、100％,P＜0.01],但对正常人成纤维细胞无明显抑制作用(P＞0.05)；Ad/Bcl-XL shRNA组能有效诱导结肠癌细胞中凋亡信号casepase-9、casepase-3、PARP的活化.在裸鼠荷瘤模型中,与Ad/GFP、PBS组相比,Ad/Bcl-XL shRNA组显著抑制DLD1来源皮下肿瘤的生长[第29天时,(250.1±185.7) vs(880.0±286.1)、(911.0 ±389.1) mm3;P ＜0.01].结论:Ad/Bcl-XL shRNA能显著抑制结肠癌细胞在体内外的生长,其在结肠癌治疗中具有潜在的应用价值.
作者：胡静姿；周玮；王晓炜；戴胜
来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2012 年 19卷 1期
