目的:观察体外培养不同时间后冻存对人脐血来源细胞因子诱导杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞增殖、免疫表型、细胞毒活性以及细胞因子分泌的影响.方法:CIK细胞在体外培养6、9、12 d后冻存1个月,复苏后培养至72 h,其间每隔24 h检测细胞增殖情况,并采用流式细胞术检测复苏后细胞免疫表型、CCK-8法检测复苏后细胞对A549细胞的杀伤活性、ELISA方法检测复苏后CIK细胞分泌细胞因子IFN-γ和TNF-α的变化.结果:体外培养不同时间后冻存的CIK细胞在复苏后仍然显示出较好的增殖活性,其中,体外培养6d后冻存组CIK细胞增殖活性明显高于体外培养9d和12 d后冻存组CIK细胞,复苏72 h时,6、9、12d冻存组CIK细胞数分别为(35.90±1.67)×106、(18.98±2.13)×106和(11.76±2.12)×106个(P ＜0.01).体外培养6、9、12 d后冻存组CIK细胞复苏24h后,各冻存组CD3+ CD56+、CD3+ CD8+细胞比例逐渐增加,且复苏72 h后6d冻存组CIK细胞中CD3+ CD56+和CD3+ CD8+细胞比例最低.体外培养后冻存组CIK细胞在复苏24h内对A549细胞的杀伤活性较低,但24 h后细胞毒活性有较大幅度的增加,且体外培养12 d后冻存组CIK细胞对A549细胞的杀伤活性高于6d和9d冻存组CIK细胞,如复苏后72 h,12、6、9d冻存组CIK细胞对A549细胞的抑瘤率分别为(0.81±0.09)％

作者：王小燕；王翔；赵令卉；郑榆坤；陈静娴；申重阳；邓红梅；张校通；漆巨兰

来源：中国肿瘤生物治疗杂志 2013 年 20卷 3期