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目的:观察c-FLIP-L对TRAIL诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其具体机制.方法:构建靶向c-FLIP-L的siRNA质粒,转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR、Weston blotting验证基因抑制效果.实验分空白对照组、TRAIL组、c-FLIP-L siRNA组和c-FLIP-L siRNA+ TRAIL组共4组,MTT法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖情况,流式细胞术检测MDA-MB-231细胞凋亡率,Transwell实验检测MDA-MB-231细胞侵袭能力,RT-PCR、Western blotting检测MDA-MB-231细胞中c-FLIP-L、caspase-3、caspase-8、MMP-2、MMP-9的表达.结果:靶向c-FLIP-L的siRNA质粒转染至乳腺癌细胞株可有效抑制c-FLIP-L mRNA[(37.12±3.02) vs(183.21 ± 8.31),(174.65 ± 10.06);P <0.05]及其蛋白的水平.c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理MDA-MB-231细胞,与两者单独处理相比,细胞增殖抑制率显著升高[72 h时,(75.51±2.01)% vs (33.75±1.60)%,(34.31±2.01)%;均P<0.05],凋亡率显著升高[72 h时,(76.30±4.11)% vs (38.95±2.14)%,(29.28±1.66)%;均P<0.05],对细胞侵袭能力的抑制也显著增强.c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理后,与两者单独处理相比,乳腺癌细胞中casepase-3、casepase-8的表达显著增强,而MMP-2、MMP-9的表达明显减弱.结论:抑制c-FLIP-L表达能够增强

作者:孙大鹏;贺成业;张凤香;韩冠英

来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2014 年 21卷 1期

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作者:
孙大鹏;贺成业;张凤香;韩冠英
来源:
中国肿瘤生物治疗杂志 2014 年 21卷 1期
标签:
乳腺癌 MDA-MB-231细胞 TRAIL c-FLIP-L 凋亡 breast cancer MDA-MB-231 cell TRAIL c-FLIP-L apoptosis
目的:观察c-FLIP-L对TRAIL诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其具体机制.方法:构建靶向c-FLIP-L的siRNA质粒,转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR、Weston blotting验证基因抑制效果.实验分空白对照组、TRAIL组、c-FLIP-L siRNA组和c-FLIP-L siRNA+ TRAIL组共4组,MTT法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖情况,流式细胞术检测MDA-MB-231细胞凋亡率,Transwell实验检测MDA-MB-231细胞侵袭能力,RT-PCR、Western blotting检测MDA-MB-231细胞中c-FLIP-L、caspase-3、caspase-8、MMP-2、MMP-9的表达.结果:靶向c-FLIP-L的siRNA质粒转染至乳腺癌细胞株可有效抑制c-FLIP-L mRNA[(37.12±3.02) vs(183.21 ± 8.31),(174.65 ± 10.06);P <0.05]及其蛋白的水平.c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理MDA-MB-231细胞,与两者单独处理相比,细胞增殖抑制率显著升高[72 h时,(75.51±2.01)% vs (33.75±1.60)%,(34.31±2.01)%;均P<0.05],凋亡率显著升高[72 h时,(76.30±4.11)% vs (38.95±2.14)%,(29.28±1.66)%;均P<0.05],对细胞侵袭能力的抑制也显著增强.c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理后,与两者单独处理相比,乳腺癌细胞中casepase-3、casepase-8的表达显著增强,而MMP-2、MMP-9的表达明显减弱.结论:抑制c-FLIP-L表达能够增强