目的:探讨Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)在低氧环境下对小鼠乳腺癌4T1细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:Real-time PCR和Western blotting分别检测低氧条件对4T1细胞内RUNX1、RUNX2、RUNX3 mRNA和RUNX2蛋白表达的影响;采用小干扰RNA技术与真核重组质粒DNA过表达技术降低或者提高4T1细胞RUNX2的表达,免疫共沉淀法检测4T1细胞中RUNX2与其他蛋白之间的相互结合情况,流式细胞术检测常氧/低氧条件下干扰/过表达RUNX2对4T1细胞凋亡的影响.结果:低氧条件下4T1细胞中RUNX1和RUNX2 mRNA的表达水平上调(P<0.05),RUNX2的蛋白表达量明显增加;转染RUNX2-siRNA-1415和真核表达载体pcDNA3.1 (-)-RUNX2可使4T1细胞内RUNX2水平明显降低或升高;在常氧或低氧条件下,沉默RUNX2 mRNA的表达均导致小鼠乳腺癌4T1细胞凋亡率上升[常氧:(12.83±0.24)% vs(9.3±0.55)%,P<0.05;低氧:(19.77±0.59)%vs (15.13±0.32)%,P<0.05],而过表达RUNX2均导致4T1细胞凋亡率下降[常氧:(9.97±0.27)%vs (14.07±0.80)%,P<0.05;低氧:(22.43±1.02)%vs(34.93±0.71)%,P<0.05].在低氧条件下,缺氧诱导因子-1α(hypoxia induced factor-1α,HIF-1 α)与RUNX2的表达上升,RUNX2能与HIF-1α形成复合物.结论:
作者:林妘;徐双;钱程
来源:中国肿瘤生物治疗杂志 2017 年 24卷 4期