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目的 通过体外构建携带抗氧化基因核因子E2相关因子2(Nrf2)的骨髓间充质干细胞(BMSC),观察Nrf2对百草枯所致肺损伤模型小鼠的保护作用.方法 构建携带有Nrf2基因的过表达慢病毒并转染BMSCs,建立携带有抗氧化基因Nrf2的BMSCs体系.将120只清洁级Balb/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组、PQ染毒模型组、BMSCs治疗组、携带空载基因的BMSCs治疗组(BMSC-Cherry治疗组)、携带Nrf2基因的BMSCs治疗组(BMSC-Nrf2治疗组)5组,每组24只.腹腔注射PQ溶液25 mg/kg复制小鼠PQ中毒肺损伤模型,正常对照组给予等体积生理盐水;BMSC治疗组、BMSC-Cherry治疗组、BMSC-Nrf2治疗组于制模后6h经球后注射相应的BMSCs 0.3 mL,每只1×106个.制模后处死小鼠取肺组织,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织Nrf2蛋白表达;留取血液标本,用化学比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)等氧化应激指标,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-1β (IL-1 β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症指标,用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况.结果 与正常对照组比较,制模后3d和21 d,PQ染毒模型组、BMSC治疗组、BMSC-Cherry治疗组、BMSC-Nrf2治疗组的Nrf2蛋白表达均显著升高,且以BMSC-Nrf2组21 d升高最

作者:吴优;刘虹;丁颖威;卢阳;陈肖;蔡旗旗;洪广亮;赵光举;卢中秋

来源:中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 1期

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作者:
吴优;刘虹;丁颖威;卢阳;陈肖;蔡旗旗;洪广亮;赵光举;卢中秋
来源:
中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 1期
标签:
百草枯中毒 肺损伤 骨髓间充质干细胞 抗氧化基因核因子E2相关因子2 Paraquat intoxication Lung injury Bone marrow mesenchymal stem cell Nuclear factor erythroid 2-related factor 2
目的 通过体外构建携带抗氧化基因核因子E2相关因子2(Nrf2)的骨髓间充质干细胞(BMSC),观察Nrf2对百草枯所致肺损伤模型小鼠的保护作用.方法 构建携带有Nrf2基因的过表达慢病毒并转染BMSCs,建立携带有抗氧化基因Nrf2的BMSCs体系.将120只清洁级Balb/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组、PQ染毒模型组、BMSCs治疗组、携带空载基因的BMSCs治疗组(BMSC-Cherry治疗组)、携带Nrf2基因的BMSCs治疗组(BMSC-Nrf2治疗组)5组,每组24只.腹腔注射PQ溶液25 mg/kg复制小鼠PQ中毒肺损伤模型,正常对照组给予等体积生理盐水;BMSC治疗组、BMSC-Cherry治疗组、BMSC-Nrf2治疗组于制模后6h经球后注射相应的BMSCs 0.3 mL,每只1×106个.制模后处死小鼠取肺组织,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织Nrf2蛋白表达;留取血液标本,用化学比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)等氧化应激指标,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-1β (IL-1 β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症指标,用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况.结果 与正常对照组比较,制模后3d和21 d,PQ染毒模型组、BMSC治疗组、BMSC-Cherry治疗组、BMSC-Nrf2治疗组的Nrf2蛋白表达均显著升高,且以BMSC-Nrf2组21 d升高最