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目的 观察生理盐水(NS)、羟乙基淀粉130/0.4氯化钠溶液(万汶)及乳酸钠林格溶液对脂多糖(LPS)刺激后的人Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)株A549产生凝血及纤溶相关因子的影响,并寻找最佳刺激剂量.方法 将处于对数生长期的A549细胞按随机数字表法分为空白对照组、LPS损伤组、NS组、万汶组及林格组,每组再分为20%及40%组;各组加入终浓度为75 mg/L的LPS体外刺激A549细胞株,空白对照组仅加普通培养液.培养12h后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中组织因子(TF)、可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)、纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)的蛋白含量及mRNA表达水平,并计算PAI-1/t-PA蛋白和mRNA的比值.结果 与空白对照组比较,LPS损伤组TF、sEPCR、PAI-1、t-PA蛋白含量均明显增高,PAI-1/t-PA蛋白比值也明显增高;LPS损伤组相应的TF、EPCR、PAI-1及t-PA的mRNA表达也明显升高.与LPS损伤组比较,20%、40% NS组TF、sEPCR、PAI-1、t-PA蛋白表达均明显降低,而40% NS组降低更为明显,但仍高于空白对照组,40% NS组PAI-1/t-PA蛋白比值较LPS组明显降低.20%、40% NS组TF和sEPCR的mRNA表达及40% NS组PAI-1和t-PAmRNA表达均较LPS损伤组明显降低,且仍以40% NS

作者:刘雨晴;刘博;姚玲;沈锋

来源:中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 3期

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刘雨晴;刘博;姚玲;沈锋
来源:
中国中西医结合急救杂志 2016 年 23卷 3期
标签:
Ⅱ型肺泡上皮细胞 A549细胞 脂多糖 急性呼吸窘迫综合征 凝血/纤溶 乳酸钠林格注射液 羟乙基淀粉130/0.4氯化钠注射液 0.9%氯化钠注射液 Type Ⅱ alveolar epithelial cell A549 cells Lipopolysaccharide Acute respiratory distress syndrome Coagulation/fibrinolysis Sodium lactate ringer injection Hydroxyethyl starch 130/0.4 sodium chloride injection 0.9% sodium chloride injection
目的 观察生理盐水(NS)、羟乙基淀粉130/0.4氯化钠溶液(万汶)及乳酸钠林格溶液对脂多糖(LPS)刺激后的人Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)株A549产生凝血及纤溶相关因子的影响,并寻找最佳刺激剂量.方法 将处于对数生长期的A549细胞按随机数字表法分为空白对照组、LPS损伤组、NS组、万汶组及林格组,每组再分为20%及40%组;各组加入终浓度为75 mg/L的LPS体外刺激A549细胞株,空白对照组仅加普通培养液.培养12h后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中组织因子(TF)、可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)、纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)的蛋白含量及mRNA表达水平,并计算PAI-1/t-PA蛋白和mRNA的比值.结果 与空白对照组比较,LPS损伤组TF、sEPCR、PAI-1、t-PA蛋白含量均明显增高,PAI-1/t-PA蛋白比值也明显增高;LPS损伤组相应的TF、EPCR、PAI-1及t-PA的mRNA表达也明显升高.与LPS损伤组比较,20%、40% NS组TF、sEPCR、PAI-1、t-PA蛋白表达均明显降低,而40% NS组降低更为明显,但仍高于空白对照组,40% NS组PAI-1/t-PA蛋白比值较LPS组明显降低.20%、40% NS组TF和sEPCR的mRNA表达及40% NS组PAI-1和t-PAmRNA表达均较LPS损伤组明显降低,且仍以40% NS