目的 探讨腺苷A2B受体(A2BR)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导肺微血管内皮炎性损伤中的作用及机制.方法 体外培养人肺微血管内皮细胞(HPMECs),分别进行TNF-α 剂量-时效实验和A2BR靶向激动剂/抑制剂干预实验.① 剂量-时效实验:先将细胞分为5组,分别加入终浓度为0(空白对照)、20、50、100、150μg/L的TNF-α 孵育24 h,选最佳刺激浓度;另取细胞分为6组,以终浓度100μg/L TNF-α 分别培养HPMECs 0、4、8、12、24、36 h,确定最佳作用时间.检测各组细胞A2B mRNA和蛋白表达情况.②A2BR的靶向激动剂/抑制剂干预实验:将细胞分为1μmol/L A2BR靶向激动剂BAY60-6583+100μg/L TNF-α 组(B+T组)、1μmol/L A2BR靶向抑制剂PSB1115+100μg/L TNF-α 组(P+T组)和TNF-α、BAY60-6583、PSB1115单独刺激组以及空白对照组.检测各组细胞活性、细胞周期以及血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)的蛋白表达水平.结果 ① 剂量-时效实验:将空白对照组的值设为1,随着TNF-α 浓度的升高,A2BR mRNA(2-ΔΔCt)及蛋白(灰度值)表达水平逐渐增加,以100μg/L TNF-α 作用后A2BR mRNA及蛋白表达水平升高最为显著(分别为7.95±0.78和1.84±0.16);用100μg/L TNF-α 作用HPMECs不同时间后,随处理时间延长A2BR的mRNA(2-Δ

作者：王慧霞；郭晓夏；赵慧颖；王梦楠；安友仲

来源：中国中西医结合急救杂志 2018 年 25卷 4期