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目的:探讨高糖对体外培养的系膜细胞诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的调节作用及NO合成的变化,以及上述变化对细胞外基质(ECM)合成的影响.方法:利用脂多糖(LPS)诱导系膜细胞表达iNOS,观察5.6、10、25、40 mmol/L不同糖浓度,在0、4、24、48 h不同时间点培养的系膜细胞iNOS mRNA表达的变化及培养上清中NO、Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白含量的变化,以相同渗透压的甘露醇为对照组.细胞增殖测定采用MTT法,iNOS表达采用RT-PCR的方法,NO的检测采用硝酸还原法,Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白的测定采用ELISA法.结果:高糖抑制系膜细胞增殖;LPS刺激后系膜细胞可表达iNOS;高糖浓度时iNOS mRNA表达增加,呈浓度和时间依赖性,相同渗透压的甘露醇无类似作用(P<0.01);随着糖浓度的升高和时间延长,实验组上清中NO含量增加,Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白含量增加.结论:高糖可上调系膜细胞iNOS mRNA的表达和促进NO、Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白的合成.

作者:常明;刘书馨;杨溟;王志宏;刘焱

来源:中国中西医结合肾病杂志 2005 年 6卷 4期

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作者:
常明;刘书馨;杨溟;王志宏;刘焱
来源:
中国中西医结合肾病杂志 2005 年 6卷 4期
标签:
高糖 糖尿病肾病 诱生型一氧化氮合酶 一氧化氮 细胞外基质
目的:探讨高糖对体外培养的系膜细胞诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的调节作用及NO合成的变化,以及上述变化对细胞外基质(ECM)合成的影响.方法:利用脂多糖(LPS)诱导系膜细胞表达iNOS,观察5.6、10、25、40 mmol/L不同糖浓度,在0、4、24、48 h不同时间点培养的系膜细胞iNOS mRNA表达的变化及培养上清中NO、Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白含量的变化,以相同渗透压的甘露醇为对照组.细胞增殖测定采用MTT法,iNOS表达采用RT-PCR的方法,NO的检测采用硝酸还原法,Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白的测定采用ELISA法.结果:高糖抑制系膜细胞增殖;LPS刺激后系膜细胞可表达iNOS;高糖浓度时iNOS mRNA表达增加,呈浓度和时间依赖性,相同渗透压的甘露醇无类似作用(P<0.01);随着糖浓度的升高和时间延长,实验组上清中NO含量增加,Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白含量增加.结论:高糖可上调系膜细胞iNOS mRNA的表达和促进NO、Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白的合成.