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目的:观察汉防己甲素(Tet)对马兜铃酸AI(AAI)诱导的肾小管上皮细胞Bcl-2/Bax表达及细胞内钙离子影响.方法:将人近端肾小管上皮细胞株(HK-2),随机分为正常组、模型组、汉防己甲素高、中、低浓度组和泼尼松龙组共6组.除正常组外,余5组用AAI(10μ/ml)刺激体外培养的HK-2;Tet高、中、低浓度组和泼尼松龙组分别加入500 ng/ml、100 ng/ml、20 ng/ml的Tet及500 ng/ml的泼尼松龙.细胞培养36 h后,观察其形态;用RT-PCR法检测各组Bcl-2、BaxmRNA表达水平;用Western-blotting法检测各组Bcl-2、Bax蛋白表达水平;激光共聚焦显微镜检测各组细胞内钙离子浓度变化.结果:经AAI刺激后,模型组的细胞形态、排列、数目与正常组比较均有明显的变化,表现为HK-2明显拉长梭形变,细胞间排列明显松散,细胞数目明显减少,Tet及泼尼松龙干预组细胞的改变明显轻于模型组,尤其是Tet各组;与模型组相比,Tet高、中浓度组及泼尼松龙组均能显著升高Bcl-2 mRNA表达(1.20±0.18、1.03±0.14和1.01±0.13比0.59±0.04,均P<0.05),Bcl-2蛋白表达(1.00±0.01、0.86±0.07和0.93±0.07比0.28±0.19,均P<0.05);降低Bax mRNA表达(0.74±0.19、0.88±0.11和0.82±0.03比1.15±0.10,均P<0.05)和Bax蛋白表达(0.80±0.07、0.81±0.03和0.82±0.03比0.97±0.05

作者:程晓霞;王军;杨雅丽;杨汝春;朱晓玲

来源:中国中西医结合肾病杂志 2010 年 11卷 11期

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作者:
程晓霞;王军;杨雅丽;杨汝春;朱晓玲
来源:
中国中西医结合肾病杂志 2010 年 11卷 11期
标签:
汉防己甲素 马兜铃酸A 细胞凋亡 Bcl-2 Bax 钙离子
目的:观察汉防己甲素(Tet)对马兜铃酸AI(AAI)诱导的肾小管上皮细胞Bcl-2/Bax表达及细胞内钙离子影响.方法:将人近端肾小管上皮细胞株(HK-2),随机分为正常组、模型组、汉防己甲素高、中、低浓度组和泼尼松龙组共6组.除正常组外,余5组用AAI(10μ/ml)刺激体外培养的HK-2;Tet高、中、低浓度组和泼尼松龙组分别加入500 ng/ml、100 ng/ml、20 ng/ml的Tet及500 ng/ml的泼尼松龙.细胞培养36 h后,观察其形态;用RT-PCR法检测各组Bcl-2、BaxmRNA表达水平;用Western-blotting法检测各组Bcl-2、Bax蛋白表达水平;激光共聚焦显微镜检测各组细胞内钙离子浓度变化.结果:经AAI刺激后,模型组的细胞形态、排列、数目与正常组比较均有明显的变化,表现为HK-2明显拉长梭形变,细胞间排列明显松散,细胞数目明显减少,Tet及泼尼松龙干预组细胞的改变明显轻于模型组,尤其是Tet各组;与模型组相比,Tet高、中浓度组及泼尼松龙组均能显著升高Bcl-2 mRNA表达(1.20±0.18、1.03±0.14和1.01±0.13比0.59±0.04,均P<0.05),Bcl-2蛋白表达(1.00±0.01、0.86±0.07和0.93±0.07比0.28±0.19,均P<0.05);降低Bax mRNA表达(0.74±0.19、0.88±0.11和0.82±0.03比1.15±0.10,均P<0.05)和Bax蛋白表达(0.80±0.07、0.81±0.03和0.82±0.03比0.97±0.05