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目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)PVT1通过调控miR-455对糖尿病肾病足细胞损伤和凋亡的影响.方法:采用高糖刺激永生化小鼠足细胞建立糖尿病肾病足细胞损伤模型,实验分为正常糖(NG)组:5.6 mmol/L葡萄糖,高糖(HG)组:30 mmol/L葡萄糖,高糖+转染对照(HG+si-NC)组:30 mmol/L葡萄糖+siRNA control,高糖+转染(HG+si-PVT1)组:30 mmol/L葡萄糖+PVT1 siRNA.各组足细胞处理48 h后采用qRT-PCR检测细胞中PVT1和的miR-455的表达水平,荧光素酶报告实验检测PVT1和miR-455的靶向关系,Western blot检测足细胞标记蛋白Nephrin、WT-1和损伤因子Desmin的表达水平,流式细胞术检测足细胞凋亡情况.结果:与NG组相比,HG组足细胞中PVT1的表达明显升高,miR-455的表达水平明显降低,Nephrin、WT-1蛋白表达明显下调,Desmin蛋白表达明显上调,足细胞凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HG组相比,HG+si-PVT1组足细胞中PVT1的表达水平明显降低,miR-455的表达水平明显升高,Nephrin、WT-1蛋白表达明显上调,Desmin蛋白表达明显下调,足细胞凋亡率明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).荧光素酶报告实验结果表明PVT1能够靶向调控miR-455.结论:敲低PVT1可通过上调miR-455的表达抑制高糖诱导的足细胞损伤和凋亡.

作者:叶凤;肖锋;宋彩霞

来源:中国中西医结合肾病杂志 2020 年 21卷 7期

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作者:
叶凤;肖锋;宋彩霞
来源:
中国中西医结合肾病杂志 2020 年 21卷 7期
标签:
lncRNA PVT1 miR-455 足细胞损伤 糖尿病肾病
目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)PVT1通过调控miR-455对糖尿病肾病足细胞损伤和凋亡的影响.方法:采用高糖刺激永生化小鼠足细胞建立糖尿病肾病足细胞损伤模型,实验分为正常糖(NG)组:5.6 mmol/L葡萄糖,高糖(HG)组:30 mmol/L葡萄糖,高糖+转染对照(HG+si-NC)组:30 mmol/L葡萄糖+siRNA control,高糖+转染(HG+si-PVT1)组:30 mmol/L葡萄糖+PVT1 siRNA.各组足细胞处理48 h后采用qRT-PCR检测细胞中PVT1和的miR-455的表达水平,荧光素酶报告实验检测PVT1和miR-455的靶向关系,Western blot检测足细胞标记蛋白Nephrin、WT-1和损伤因子Desmin的表达水平,流式细胞术检测足细胞凋亡情况.结果:与NG组相比,HG组足细胞中PVT1的表达明显升高,miR-455的表达水平明显降低,Nephrin、WT-1蛋白表达明显下调,Desmin蛋白表达明显上调,足细胞凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HG组相比,HG+si-PVT1组足细胞中PVT1的表达水平明显降低,miR-455的表达水平明显升高,Nephrin、WT-1蛋白表达明显上调,Desmin蛋白表达明显下调,足细胞凋亡率明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05).荧光素酶报告实验结果表明PVT1能够靶向调控miR-455.结论:敲低PVT1可通过上调miR-455的表达抑制高糖诱导的足细胞损伤和凋亡.