目的:在体内外模型中研究草酸钙晶体诱导的肾脏自噬和上皮间质转分化(epithelial mesenchymal transition,EMT)以及自噬在EMT中的作用.方法:(1)将20只C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组.检测小鼠血肌酐及尿素氮水平;取肾组织做免疫组化及westernblot检测.(2)应用一水草酸钠刺激HK2细胞株构建细胞模型,予雷帕霉素、3MA干预后检测细胞活性、自噬及EMT蛋白表达情况.结果:(1)造模组小鼠肾脏皮髓质交界处可见大量草酸钙晶体,伴随肾小管上皮细胞损伤;肾组织westernblot检测提示:LC3B、Beclin-1、α-SMA蛋白表达显著升高,E-cadherin表达显著下调(P<0.05).(2)一水草酸钠处理HK2细胞后由鹅卵石样变成梭形,伴随细胞损伤,成时间和剂量依赖性;(3)一水草酸钠作用12 h后自噬及EMT蛋白表达升高,24 h到达高峰,随着时间延长逐渐下降,且细胞损伤加重;加予雷帕霉素处理后,α-SMA及Vimen-tin的表达进一步增加,细胞死亡程度加重.结论:自噬参与并加重早期草酸钙结晶肾损伤EMT的进程;通过抑制自噬可以改善草酸钙结晶肾损伤程度.
作者：李璐；张陵艳；谌卫；丁家荣；赵婷婷；郭志勇
来源：中国中西医结合肾病杂志 2022 年 23卷 6期
