目的:观察microRNA20b对缺氧/复氧诱导内皮细胞凋亡的影响.方法:采用人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)建立缺氧/复氧损伤细胞模型.将生长状态良好的HUVECs随机分为正常对照组(Normal组)、缺氧后阴性对照组(HR+NC组)、缺氧后microRNA20b过表达组(HR+20b组)、缺氧后阴性对照抑制组(HR+IN NC组)和缺氧后microRNA20b抑制组(HR+IN 20b组).缺氧前24 h采用lipofectamine2000将Negative Control、microRNA20b mimics、inhibitor Negative Control、microRNA20b inhibitor分别转染入后四组细胞,然后缺氧培养12 h后复氧4 h.采用免疫荧光检测过氧化物酶体增值物受体γ(PPARγ)蛋白的变化,AnnexinV-FITC/PI流式双染法检测细胞的早晚期凋亡率,Western blot检测PPARγ以及凋亡相关蛋白Bax、抗凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平.结果:与Normal组相比,缺氧/复氧损伤后各转染组PPARγ蛋白表达升高,凋亡率升高.与HR+NC组相比,HR+20b组的PPARγ及凋亡相关蛋白Bax表达降低、抗凋亡相关蛋白Bcl-2表达升高,凋亡率降低[(7.70+0.85)
作者:卢悦;王晶晶;梁广彬;胡喆;张良清
来源:中国中西医结合外科杂志 2017 年 23卷 3期