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目的:沉默宫颈癌细胞中的Twist基因,并予紫杉醇作用,研究其增殖、克隆、凋亡的情况,揭示Twist基因是否引起宫颈癌细胞紫杉醇耐药。方法:1.体外培养宫颈癌Caski细胞,利用Lipofectamine TM 2000将各组siRNA转入宫颈癌Caski细胞中,荧光定量PCR检测Twist mRNA表达,筛选出沉默Twist基因效果最佳siRNA;瞬时转染Caski细胞,予1umol/L 浓度紫杉醇溶液作用,MTT法检测细胞半数抑制浓度(IC50);流式细胞学术检测细胞凋亡情况。结果:在1umol/L(IC50)紫杉醇作用各组Caski细胞不同时间后,si-Twist 组细胞生长抑制率明显高于NC-Twist组及Mock组(p<0.05):1umol/L紫衫醇作用后, si-Twist组、NC-Twist组凋亡率分别为43.21±6.19%、26.16±5.89%,si-Twist 组凋亡率明显高于NC-Twist组,其差异显著(p<0.05结论:Twist基因在Caski细胞中高表达。沉默Twist基因,予紫杉醇作用后,可抑制Caski细胞增殖及克隆,促进其凋亡,从而提高其化疗敏感性。

作者:孙晓红

来源:中国中医药科技 2014 年 z2期

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作者:
孙晓红
来源:
中国中医药科技 2014 年 z2期
标签:
宫颈癌 Caski细胞 RNA干扰 Twist基因 化疗敏感性
目的:沉默宫颈癌细胞中的Twist基因,并予紫杉醇作用,研究其增殖、克隆、凋亡的情况,揭示Twist基因是否引起宫颈癌细胞紫杉醇耐药。方法:1.体外培养宫颈癌Caski细胞,利用Lipofectamine TM 2000将各组siRNA转入宫颈癌Caski细胞中,荧光定量PCR检测Twist mRNA表达,筛选出沉默Twist基因效果最佳siRNA;瞬时转染Caski细胞,予1umol/L 浓度紫杉醇溶液作用,MTT法检测细胞半数抑制浓度(IC50);流式细胞学术检测细胞凋亡情况。结果:在1umol/L(IC50)紫杉醇作用各组Caski细胞不同时间后,si-Twist 组细胞生长抑制率明显高于NC-Twist组及Mock组(p<0.05):1umol/L紫衫醇作用后, si-Twist组、NC-Twist组凋亡率分别为43.21±6.19%、26.16±5.89%,si-Twist 组凋亡率明显高于NC-Twist组,其差异显著(p<0.05结论:Twist基因在Caski细胞中高表达。沉默Twist基因,予紫杉醇作用后,可抑制Caski细胞增殖及克隆,促进其凋亡,从而提高其化疗敏感性。