目的:探究槲皮素在体外抑制小鼠肺纤维化的潜在分子机制.方法:用TGF-β刺激小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞NIH3T3构建体外纤维化模型,然后用槲皮素处理,MTT法检测各组细胞不同时间(0、12、24、48 h)细胞增殖情况.ELISA法检测细胞培养液中Ⅰ型胶原Coll和透明质酸酶HA的含量;收集细胞并提取总RNA和总蛋白,采用RT-PCR法检测细胞中TGF-β1超家族信号转导蛋白7(Smad7) mRNA的表达;Western blot检测细胞中TGF-β1超家族信号转导蛋白7(Smad7)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)的表达.结果:槲皮素能够抑制TGF-β诱导NIH3T3细胞的增殖(P<0.05).ELISA检测结果显示槲皮素处理组细胞分泌的Coll与HA的含量较空白组降低(P<0.05).Westemblot和RT-qPCR结果显示,Smad7表达水平较对照组显著升高(P<0.05),α-SMA、FN蛋白的表达水平显著降低(P<0.05).结论:槲皮素能够缓解TGF-β诱导的小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞NIH3T3纤维化,作用机制可能是通过调控Smad7信号来实现的.
作者:陈将;章小敏;叶爱菊;叶亚丽;刘月波
来源:中国中医药科技 2018 年 25卷 5期