目的 观察清肝利水方(QGLS)在慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡中的抑制效果,并探讨其作用机制与瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)/Ca2+信号通路的关系.方法 制备大鼠QGLS含药血清,进行细胞毒性试验,确定合适的干预浓度.用CoCl2和无糖DMEM建立RGC-5细胞缺氧缺糖-复氧复糖损伤模型,CCK-8检测正常对照组(CG)、模型组(MG)和低、中、高浓度清肝利水方含药血清组(LQGLS、MQGLS、HQGLS)的细胞增殖力,细胞凋亡试验检测细胞凋亡水平,Western Blot检测各组TRPC6、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达,Fluo-3 AM荧光探针检测细胞内钙离子浓度.结果 (1)实验条件筛选:筛选出QGLS含药血清干预浓度为5％,CoCl2造模浓度与时间为600μM处理24h.(2)细胞存活率:LQGLS、MQGLS可显著提高缺氧缺糖-复氧复糖损伤的细胞存活率,与MG比较有统计学意义(tLQGLS=25.401,tMQGLS=11.805,均P=0.000).(3)TRPC6表达:MQGLS、HQGLS较MG显著降低,差异均有统计学意义(tMQGLS=7.365,tHQGLS=9.075,均 P=0.000).(4)凋亡因子:①Caspase-3表达,3个 QGLS 剂量组较MG均显著下降,差异均有统计学意义(tLQGLS=4.816,P=0.001;tMQGLS=35.131,P=0.000;tHQGiS=28.227,P=0.000);②Bax表达,3个QGLS剂量组较MG均

作者：陈梦婷；董志国；张殷建；田源

来源：中国中医眼科杂志 2022 年 32卷 1期