目的:了解骨髓间充质干细胞( BMMSC)在染矽尘大鼠体内的分布情况。方法取7只无特定病原体级健康雄性SD大鼠采用全骨髓贴壁法分离培养BMMSC,经慢病毒载体介导的增强型绿色荧光蛋白( LV-eGFP)转染后,采用台盼蓝染色和CCK-8法检测转染前后细胞的活力及增殖能力。取同批大鼠随机分为对照组和染尘组,每组4只。染尘组以1.0 mL质量浓度为40 g/L的矽尘混悬液气管内注入染尘,对照组气管内注入1.0 mL生理氯化钠溶液。以转染后的BMMSC经尾静脉注入2组大鼠体内,分别于移植后第1、2、3和4周取肺、肝、脾、心、肾脏和脑组织冰冻切片,荧光显微镜下观察转染LV-eGFP的BMMSC植入后在上述脏器组织的荧光分布,采用Image-pro plus 6.0图像分析软件计算组织荧光强度。结果感染复数为50时,BMMSC转染率达80.00%,绿色荧光表达强烈、持续,转染后BMMSC形态无改变;转染与未转染LV-eGFP的BMMSC的细胞存活率差异无统计学意义[(97.67±0.60)% vs (98.03±0.56)%,P>0.05]。 BMMSC增殖能力在LV-eGFP转染处理的主效应上无统计学意义(P>0.05)。植入转染LV-eGFP的BMMSC后第1周,2组大鼠各脏器组织切片镜下均可见荧光分布,其中染尘组大鼠肺脏组织切片各视野均可见较强荧光,持续至植入后第4周,以气管、
作者:周永梅;黄明;燕玲;曾子芳;吴奇峰;梁伟辉;曾小菁
来源:中国职业医学 2015 年 2期