目的:观察铀矿尘对小鼠肺成纤维细胞合成胶原蛋白的影响并探讨其机制。方法①取小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞分为溶剂对照组和染尘组,分别以终浓度为0、120 mg/L的铀矿尘混悬液处理0、2、4、8、16、24和32 h后,收集细胞上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,选择最佳染尘时间,分离制备该时间点的2组细胞上清液作为条件培养液(CM)进行后续实验。②取小鼠肺成纤维细胞L929细胞分为对照组和铀矿尘组,分别予溶剂对照组和染尘组的CM处理0、6、12、18、24、30、36 h后,采用免疫组化法检测细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,ELISA法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原蛋白( COLⅠ)、III型胶原蛋白( COLⅢ)和羟脯氨酸( HYP)的水平。结果①染尘组RAW264.7细胞上清液中TGF-β1水平从染尘后4 h时间点起开始较溶剂对照组出现有统计学意义的升高( P<0.05);在染尘后4~24 h呈随染尘时间的增加而升高的时间-效应关系(P<0.05),至染尘后24 h达到峰值。取染尘后24 h时间点的2组细胞上清液作为CM进行后续实验。②相较同时间点对照组,铀矿尘组在经相应CM处理后18~36 h,L929细胞中α-SMA表达水平均上调( P<0.05),在CM处理后12~36 h,L929细胞上清液中COL
作者:宋凤梅;李躲;黄波;彭媛姣;张夏;贺性鹏
来源:中国职业医学 2016 年 43卷 5期