目的:研究纳米雄黄对药物敏感性白血病细胞的凋亡诱导作用.方法:采用机械研磨法制备纳米雄黄.以白血病药物敏感K562细胞为靶细胞,采用MTT法检测纳米雄黄对K562细胞的增殖抑制作用,AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡,细胞流式细胞术检测Bax,Bcl-2,P-gp,BCRP,P-53蛋白的表达水平,Caspase-3活性.结果:雄黄经高能球磨机球磨10~50h,扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察,电镜测量纳米雄黄的平均粒径为(72.72 ±22.18) nm,符合纳米颗粒的形貌特征.纳米雄黄对K562细胞有明显的增殖抑制作用.24,48,72 h的IC5o分别为43.48,20.52,16.07 mg·L-1.20,50 mg·L-1纳米雄黄作用48 h后Annexin V/PI染色显示凋亡细胞明显增高,凋亡率分别为10.52%,73.25%.纳米雄黄作用48 h后Bax蛋白表达由对照的(75.80±2.40)%升高到(87.50±1.20)%和(99.60±0.10)%;Bcl-2蛋白表达由对照的(73.85±0.15)%升高到(94.80±2.00)%和(97.75±0.55)%.20,50 mg·L-1纳米雄黄处理K562细胞24h后,K562细胞Caspase-3蛋白表达水平由对照的(3.14±0.24)%升高到(8.87±2.74)%和(72.55±1.45)%;细胞的BCRP,P-gp蛋白,P53蛋白表达总体呈上升趋势,共表达也呈上升趋势.结论:纳米雄黄可以显著诱导白血病药物敏感K562细胞发生凋亡.
作者:王永胜;周思彤;魏虎来
来源:中国中药杂志 2013 年 38卷 13期