目的:探讨大黄酸抑制饥饿诱导的肾小管上皮(NRK-52E)细胞自噬蛋白的作用和分子机制.方法:用Hank's平衡盐溶液(Hank's balanced salt solution,HBSS)诱导NRK-52E细胞产生饥饿状态,在干预后的各时间点(0,0.5,1,2,6 h),首先,检测细胞自噬标志性蛋白——哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)Ⅰ/Ⅱ的表达水平;其次,检测细胞哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达及其磷酸化水平(phos-phorylated-mTOR Ser2448,p-mTOR S2448);然后,以大黄酸(5 mg· L-1)、HBSS(1 mL)以及mTOR抑制剂雷帕霉素(100 nmol·L-1)单独或联合干预,分别检测其LC3 Ⅰ/Ⅱ,mTOR,p-mTOR S2448蛋白表达水平的变化.结果:HBSS诱导NRK-52E细胞LC3Ⅱ蛋白高表达、p-mTOR S2448蛋白低表达;大黄酸与HBSS联合干预可以逆转HBSS诱导的NRK-52E细胞LC3 Ⅱ和p-mTORS2448蛋白表达水平;雷帕霉素与大黄酸、HBSS联合干预可以恢复HBSS诱导的NRK-52E细胞LC3 Ⅱ蛋白表达水平.结论:HBSS抑制mTOR信号通路活性而诱导肾小管上皮细胞发生自噬;大黄酸调控mTOR信号通路活性而抑制肾小管上皮细胞白噬蛋白的表达,这可能就是其干预细胞自噬的作用和分子机制.

作者：涂玥；孙伟；顾刘宝；万毅刚；胡浩；刘红

来源：中国中药杂志 2014 年 39卷 21期