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为了探讨虫草菌丝(mycelium of Cordyceps sinensis,MCs)改善D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导的肾小管上皮细胞衰老的作用和分子机制,将体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)分为正常组(normal group,N),模型组(D-gal model group,D),低剂量MCs组(low dose of MCs,L-MCs),中剂量MCs组(medium dose of MCs,M-MCs),高剂量MCs组(high dose of MCs,H-MCs),分别进行不同的干预.具体而言,N组加入1%胎牛血清(fetal bovine ser-um,FBS)1 m L;D组加入100 mmol·L-1D-gal;L-MCs组加入100 mmol·L-1D-gal+20 mg·L-1MCs;M-MCs组加入100 mmol·L-1D-gal+40 mg·L-1MCs;H-MCs组加入100mmol·L-1D-gal+80 mg·L-1MCs.在干预后的24或48 h,首先,观察D-gal对NRK-52E细胞klotho,P27,P16蛋白表达水平,β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色以及腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)/不协调的51类激酶1(uncoordinated 51-like kinase 1,ULK1)信号活性的影响;其次,观察MCs对NRK-52E细胞增殖活性的影响;最后,观察MCs对D-gal诱导的NRK-52E细胞klotho,P27,P16蛋白表达水平,SA-β-gal染色以及哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associat

作者:刘不悔;何伟明;万毅刚;高坤;涂玥;吴薇;陶佳音;朱婧婧;陆映丹;孙伟

来源:中国中药杂志 2019 年 44卷 6期

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刘不悔;何伟明;万毅刚;高坤;涂玥;吴薇;陶佳音;朱婧婧;陆映丹;孙伟
来源:
中国中药杂志 2019 年 44卷 6期
标签:
衰老 虫草菌丝 肾小管上皮细胞 自噬 AMPK/ULK1信号通路 aging mycelium of Cordyceps sinensis renal tubular epithelial cells autophagy AMPK/ULK1 signaling pathway
为了探讨虫草菌丝(mycelium of Cordyceps sinensis,MCs)改善D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导的肾小管上皮细胞衰老的作用和分子机制,将体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)分为正常组(normal group,N),模型组(D-gal model group,D),低剂量MCs组(low dose of MCs,L-MCs),中剂量MCs组(medium dose of MCs,M-MCs),高剂量MCs组(high dose of MCs,H-MCs),分别进行不同的干预.具体而言,N组加入1%胎牛血清(fetal bovine ser-um,FBS)1 m L;D组加入100 mmol·L-1D-gal;L-MCs组加入100 mmol·L-1D-gal+20 mg·L-1MCs;M-MCs组加入100 mmol·L-1D-gal+40 mg·L-1MCs;H-MCs组加入100mmol·L-1D-gal+80 mg·L-1MCs.在干预后的24或48 h,首先,观察D-gal对NRK-52E细胞klotho,P27,P16蛋白表达水平,β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色以及腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)/不协调的51类激酶1(uncoordinated 51-like kinase 1,ULK1)信号活性的影响;其次,观察MCs对NRK-52E细胞增殖活性的影响;最后,观察MCs对D-gal诱导的NRK-52E细胞klotho,P27,P16蛋白表达水平,SA-β-gal染色以及哺乳动物同族物微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associat