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线粒体作为细胞能量供应的主要场所,是决定缺血后神经细胞生存和死亡的关键靶区.缺血性脑卒中发生时,及时清除受损线粒体对于改善线粒体功能修复神经损伤至关重要.该文旨在研究中药活性成分藁本内酯(ligustilide,LIG)对缺糖缺氧/复氧(oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)致HT22细胞损伤时线粒体功能及线粒体自噬的影响.通过体外建立OGD/R模型,经藁本内酯预处理HT22细胞3 h后,采用CCK-8法检测细胞活力;免疫荧光法及流式细胞术检测线粒体功能相关指标如线粒体膜电位、钙离子超载情况、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量变化;Western blot法检测线粒体分裂蛋白Drp1及凋亡执行蛋白cleaved caspase-3表达;免疫荧光观察线粒体标志蛋白TOMM20和自噬发生标志物——溶酶体关联膜蛋白2的共定位情况.结果显示,与模型组相比,藁本内酯可以增加HT22细胞的存活率.进一步实验表明,藁本内酯可以抑制OGD/R损伤后HT22细胞内ROS的释放、钙离子超载及线粒体膜电位的下降,同时促进线粒体分裂蛋白Drp1的表达,增加线粒体与溶酶体关联膜蛋白2的共定位.以上结果表明藁本内酯可以改善OGD/R损伤后的线粒体功能,促进线粒体自噬的发生.当给予线粒体自噬抑制剂mdivi-1后,凋亡蛋白表达升高,表明藁本内酯发挥的神经

作者:吴倩;刘娇;田丽宇;汪宁

来源:中国中药杂志 2022 年 47卷 7期

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吴倩;刘娇;田丽宇;汪宁
来源:
中国中药杂志 2022 年 47卷 7期
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藁本内酯 线粒体自噬 缺糖缺氧/复氧 HT22细胞
线粒体作为细胞能量供应的主要场所,是决定缺血后神经细胞生存和死亡的关键靶区.缺血性脑卒中发生时,及时清除受损线粒体对于改善线粒体功能修复神经损伤至关重要.该文旨在研究中药活性成分藁本内酯(ligustilide,LIG)对缺糖缺氧/复氧(oxygen and glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)致HT22细胞损伤时线粒体功能及线粒体自噬的影响.通过体外建立OGD/R模型,经藁本内酯预处理HT22细胞3 h后,采用CCK-8法检测细胞活力;免疫荧光法及流式细胞术检测线粒体功能相关指标如线粒体膜电位、钙离子超载情况、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量变化;Western blot法检测线粒体分裂蛋白Drp1及凋亡执行蛋白cleaved caspase-3表达;免疫荧光观察线粒体标志蛋白TOMM20和自噬发生标志物——溶酶体关联膜蛋白2的共定位情况.结果显示,与模型组相比,藁本内酯可以增加HT22细胞的存活率.进一步实验表明,藁本内酯可以抑制OGD/R损伤后HT22细胞内ROS的释放、钙离子超载及线粒体膜电位的下降,同时促进线粒体分裂蛋白Drp1的表达,增加线粒体与溶酶体关联膜蛋白2的共定位.以上结果表明藁本内酯可以改善OGD/R损伤后的线粒体功能,促进线粒体自噬的发生.当给予线粒体自噬抑制剂mdivi-1后,凋亡蛋白表达升高,表明藁本内酯发挥的神经