应用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)建立一种测定大鼠脑透析液中乙酰胆碱、谷氨酸、甘氨酸、去甲肾上腺素等11个神经递质的检测方法.取大鼠脑透析液20 μL,加入乙腈-水(4∶ 1)60 μL稀释,离心10 min(10000r·min-1),取5 μL 进行 UPLC-MS/MS 分析.选用 Waters ACQUITY BEH amide 色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),柱温 35℃,流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,采用梯度洗脱法,流速0.35 mL·min-1.离子源为电喷雾离子源,扫描模式为正离子模式,分析时间(du-ration)为 3.5 min,多反应监测模式(MRM).并应用该方法考察了 11个神经递质的体外探针回收率与灌流速度/神经递质浓度水平之间的关系,以及考察葛根素单用及合用冰片后对大鼠纹状体中11种神经递质含量的影响.结果表明该方法线性关系良好,线性相关系数均大于0.99,最低定量限均小于12.5 nmol·L-1,11个神经递质的批内及批间精密度RSD均小于9.3%,准确度RE 在-8.4%~9.5%.稳定性、回收率和基质效应等均符合生物样品分析要求.实验表明,给于葛根素之后大鼠脑纹状体内的大部分神经递质水平相较空白组发生了明显的改变;而大鼠同时给予冰片及葛根素之后,除多巴胺、去甲肾上腺素外,其余神经递质的变化程度较单用葛根素的变化程度小.该研究建立的UPLC-MS/MS分析
作者:潘凌云;王雨;刘新华;贾益群
来源:中国中药杂志 2022 年 47卷 12期