该研究旨在探究白术内酯Ⅲ(atractylenolide Ⅲ,ATL-Ⅲ)对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞H9c2内质网应激损伤和细胞凋亡的影响,以及对活性氧(ROS)/葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)信号通路的调控作用.采用分子对接技术检测ATL-Ⅲ与内质网应激关键蛋白GRP78的结合度,结果显示ATL-Ⅲ与GRP78有良好的结合活性,且效果优于其特异性抑制剂.基于此,建立H2O2(100 μmol·L-1)诱导的心肌细胞H9c2内质网应激损伤模型,设空白组、模型组、ATL-Ⅲ(15、30、60 μmol·L-1)组,分别用Hoechst/PI双染色法和流式细胞术检测细胞凋亡;采用比色法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;分别用荧光探针DCFH-DA、Flou-4检测细胞ROS水平和胞质钙离子(Ca2+)浓度;用Western blot法检测细胞GRP78、caspase-12、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的蛋白表达;用RT-qPCR法检测细胞GRP78、caspase-12 mRNA的表达水平;再分别用N-乙酰半胱氨酸(NAC)及4-苯基丁酸(4-PBA)抑制ROS和GRP78,观察ATL-Ⅲ对H2O2诱导的心肌细胞内质网应激损伤及细胞保护作用机制.结果显示ATL-Ⅲ(15、30、60μmol·L-1)均能显著降低心肌细胞凋亡率和ROS、MDA、LDH水平(P＜0.01),提高SOD活性(P＜0.01),

作者：左梦雨；汤同娟；周鹏；王翔；丁芮；谷金繁；陈建；王靓；姚娟；李向阳；黄金玲

来源：中国中药杂志 2022 年 47卷 16期