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探讨黄地安消胶囊(Huangdi Anxiao Capsules,HDAX)含药血清对高糖诱导大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞认知功能障碍的保护作用及可能的分子机制.构建高糖诱导PC12 细胞糖尿病认知功能障碍模型,使用mcc950 抑制NLRP3.将PC12 随机分为正常(control)组、模型(model)组、HDAX含药血清组、NLRP3 受体阻断剂(mcc950)组、HDAX含药血清+NLRP3 受体阻断剂(HDAX含药血清+mcc950)组.PC12 细胞按照分组分别处理后通过MTT法检测细胞增殖活性,Hoechst 33258/PI染色检测细胞焦亡,ELISA 法测定 PC12 中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18 水平,Western blot 检测 PC12 中突触后致密物(postsynaptic density,PSD)、焦亡相关通路蛋白NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、gasdermin D(GSDMD)、GSD-MD-N、裂解的半胱天冬酶-1 前体(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-1,cleaved caspase-1)蛋白水平;RT-PCR检测PC12 中NLRP3、ASC、GSDMD、caspase-1的mRNA 表达量,免疫荧光检测焦亡标志指标GSDMD-N、NLRP3 表达情况.结果显示,与control组相比,model组细胞增殖活性显著降低

作者:王晓娟;王雨露;邵楠;叶婷;叶树;高华武;王艳

来源:中国中药杂志 2023 年 48卷 19期

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作者:
王晓娟;王雨露;邵楠;叶婷;叶树;高华武;王艳
来源:
中国中药杂志 2023 年 48卷 19期
标签:
黄地安消胶囊含药血清 细胞焦亡 NLRP3炎症小体 PC12细胞 Huangdi Anxiao Capsules-containing serum pyroptosis NLRP3 inflammasome PC12 cells
探讨黄地安消胶囊(Huangdi Anxiao Capsules,HDAX)含药血清对高糖诱导大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞认知功能障碍的保护作用及可能的分子机制.构建高糖诱导PC12 细胞糖尿病认知功能障碍模型,使用mcc950 抑制NLRP3.将PC12 随机分为正常(control)组、模型(model)组、HDAX含药血清组、NLRP3 受体阻断剂(mcc950)组、HDAX含药血清+NLRP3 受体阻断剂(HDAX含药血清+mcc950)组.PC12 细胞按照分组分别处理后通过MTT法检测细胞增殖活性,Hoechst 33258/PI染色检测细胞焦亡,ELISA 法测定 PC12 中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18 水平,Western blot 检测 PC12 中突触后致密物(postsynaptic density,PSD)、焦亡相关通路蛋白NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、gasdermin D(GSDMD)、GSD-MD-N、裂解的半胱天冬酶-1 前体(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-1,cleaved caspase-1)蛋白水平;RT-PCR检测PC12 中NLRP3、ASC、GSDMD、caspase-1的mRNA 表达量,免疫荧光检测焦亡标志指标GSDMD-N、NLRP3 表达情况.结果显示,与control组相比,model组细胞增殖活性显著降低