目的 探讨氯通道5(chloride channel 5,ClC-5)对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞凋亡的作用及其机制.方法 用免疫荧光和Western blot法检测MM细胞系(ARH77、U266和RPMI8266)和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中ClC-5的表达.ClC-5 siRNA转染MM细胞和PBMC细胞后,CCK-8法检测细胞活性.敲降ARH77和U266细胞中ClC-5后,用Hoechst 33258染色观察细胞核形态,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,JC-1染色检测线粒体膜电位,Western blot检测细胞色素c(cytochrome c,cyt-c)释放和Cleaved Caspase-3表达.结果 与PBMC细胞比较,ClC-5在MM细胞中表达升高.敲降ClC-5后,ARH77和U266的细胞活性降低,但PBMC的细胞活性不变.进一步研究显示,敲降ClC-5能导致ARH77和U266的细胞核固缩,凋亡增加,线粒体膜电位降低,促进线粒体cyt-c释放到细胞质,并增加Cleaved Caspase-3表达.结论 敲降ClC-5能通过线粒体凋亡通路来促进MM细胞凋亡.
作者:苗玉迪;胡星星;李艳春
来源:中国组织化学与细胞化学杂志 2022 年 31卷 3期