目的 探讨儿童神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)ALK蛋白表达与ALK基因遗传学及表观遗传学改变的相关性,并分析NB的ALK蛋白表达异常及ALK基因异常的临床病理学意义.方法 培养三个NB细胞株,其中两株为ALK阳性表达(SH-SY5Y和SK-N-SH),一株为ALK阴性表达(SK-N-AS),并收集43例NB石蜡包埋组织标本及相应临床资料;运用免疫组织化学EnVision法检测NB细胞株及石蜡包埋组织标本的ALK蛋白表达;运用荧光原位杂交(FISH)检测ALK基因的拷贝数;运用PCR技术、Sanger测序技术检测ALK基因点突变;运用重亚硫酸盐测序技术(BSP)检测ALK基因启动子区CpG岛的甲基化状态.结果 SH-SY5Y和SK-N-SH细胞株的ALK蛋白表达于胞质,而SK-N-AS无ALK蛋白表达;43例神经母细胞瘤组织中,ALK蛋白阳性者26例(60.5％,26/43),阴性者17例(39.5％,17/43),ALK蛋白表达与患者的生存期相关,ALK蛋白阳性表达者,生存期较短(P =0.020),但ALK蛋白表达与NB的分化状态(P=0.503)、发病部位(P=1.000)及年龄(P =0.063)无相关性.43例NB中,ALK基因扩增者2例(4.6％,2/43),ALK基因获得者30例(69.7％,30/43),余者ALK基因正常(25.6％,11/43),ALK基因多拷贝(包括扩增和获得)与ALK蛋白阳性表达有明显相关性(P =0.020),ALK基因多拷贝倾向ALK蛋白的阳性表达;ALK基因多拷贝与NB的

作者：陈烁；周春菊；马晓莉；宫丽平

来源：中华病理学杂志 2014 年 43卷 8期